结核病的“元凶”是如何被找到的

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2023年3月24日是第28个世界防治结核病日,今年的宣传主题是“你我共同努力,终结结核流行”。由结核分枝杆菌(MTB)感染引起的结核病已严重危害人类健康。据估计,世界上约有四分之一的人口感染MTB,其中5%~10%的感染者在其一生中会罹患结核病。近几年在国家的大力宣传下,民众的结核病防治知识知晓率得到了有效提升。

那么结核病的“元凶”结核分枝杆菌是如何被找到的,你知道吗?

结核分枝杆菌最喜欢待的地方是肺,因此痰是最常见的送检标本,肺结核主要是通过呼吸道传播,所以如果家庭成员或朋友感染肺部结核分枝杆菌,要及时给予相关治疗,且自我做好防护,避免他人感染。

抗酸染色涂片镜检法,因取样简便、检测费用低等优点是目前筛查结核病最常用的方式。其原理是分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌一经着色后就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色。抗酸杆菌涂片在淡蓝色背景下,抗酸菌呈红色,其他细菌和细胞呈蓝色。



当拿到疑似患者的痰标本后,检验科微生物室组的工作人员首先需要将其在载玻片上涂成1cm×2cm大小的卵圆形。因为结核分枝杆菌传染性比较强,在整个制片过程中工作人员需要穿上防护服,戴N95口罩,在二级生物安全柜中进行。



经过染色、脱色、复染等步骤一张抗酸杆菌涂片才能完成。接下来,检验人员会在显微镜放大1000倍的视野下观察全片,寻找那个细长略带弯曲的红色身影。一张片子常常需要观察上百个视野。在即使放大1000倍的情况下,能看到的抗酸杆菌也是非常细小的,需要检验人员耐心细致地观察全片,才能避免出现漏网之鱼。抗酸杆菌涂片阳性只能确定找到分枝杆菌,但无法确定是结核分枝杆菌,非结核分枝杆菌抗酸染色也会呈阳性。当发现抗酸杆菌后,需要进一步做X-pert来确定是否是结核分枝杆菌。X-pert就是疫情下大家所熟知的核酸检测,新冠核酸检测的是有无新冠病毒感染,而这里检测的是有无结核分枝杆菌感染。

检验人员实验室寻找“元凶”还有两把利器分别是固体培养和液体培养。结核分枝杆菌不同于其他细菌,它生长缓慢,14-18小时分裂1次,在固体培养基上2-5周才出现肉眼可见的菌落,培养阴性结果须在满8周后未见菌落生长方可报告。20世纪70年代创立了分枝杆菌液体培养,大大缩短了培养时间,一般1-2周即可生长。培养阳性是诊断活动性结核的金标准。


液体培养的结核分枝杆菌

在检验人员通过这几种方式地毯式的搜寻下,结核分枝杆菌便无处遁逃。在这里重申一下,检出率的高低很大程度上取决于标本的质量。为了提高检出率,可疑患者一般会一次送检三份痰标本:即时痰为患者就诊时深呼吸后咳出的痰液,清晨痰为清晨晨起立即用清水漱口后深咳出的痰液,夜间痰为送痰前一日夜间咳出的痰液;合格的痰标本应是脓样、干酪样或脓性黏液样性质的痰液,痰量以3mL~5mL为宜。